哮喘模型介绍

哮喘（Asthma）是一种慢性气道炎症性疾病，具有可变气流阻塞、气道高反应性(AHR)和气道炎症等特征。哮喘的主要临床症状是呼吸短促、气喘、咳嗽以及接触过敏原后粘液分泌增多。其发病是由遗传、表观遗传和环境因素之间的复杂相互作用引起的。不同的病理改变由气道上皮细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞亚群等多种参与免疫应答的细胞介导，其中Th2细胞被认为在高嗜酸性粒细胞型哮喘中占主导地位，伴随细胞因子IL-4、IL-5和IL-13水平升高。经典的小鼠哮喘模型是卵清蛋白（OVA）诱导的气道炎症模型，小鼠经多次腹腔注射OVA致敏，雾化吸入OVA后激发,建立急性哮喘模型。其血清IgE和肺泡灌洗液中的嗜酸性粒细胞水平升高，病理组织切片染色显示：气道粘液及炎症性白细胞浸润增多1, 2。

百奥赛图提供了一个有效的OVA诱导的小鼠哮喘模型，并且在不同品系（C57BL/6，B-hIL4/IL4RA mice，B-hIL33 mice）中进行了验证，可用于哮喘治疗药物的药效评价。

哮喘小鼠（C57BL/6）模型的构建及验证

OVA诱导的急性哮喘模型

实验动物：C57BL/6, BALB/c，5-6周龄，雌性

致敏阶段：在第0天、7天、14天，腹腔注射OVA+Al(OH)₃；

激发阶段：在21-25天，每天使用2%的OVA雾化小鼠30min。

哮喘小鼠模型肺泡灌洗液（BALF）中免疫细胞的数量

使用OVA在野生型C57BL/6小鼠中诱导哮喘模型。（A）BALF 中CD45+细胞的数量；（B）BALF 中嗜酸性粒细胞的数量；（C）嗜酸性粒细胞占CD45+细胞的比例。结果显示：经OVA致敏和激发后，G2造模组小鼠的白细胞数量与G1未造模组相比显著增加，其中嗜酸性粒细胞数量及比例都有显著增加。

哮喘小鼠模型血清中IgE水平

哮喘小鼠模型血清中IgE水平的检测。实验终点取血清，使用ELISA检测OVA特异性的IgE和血清总IgE的浓度。（A）血清中OVA 特异性IgE的浓度。（B）血清中总IgE的浓度。结果显示：G2造模组与G1未造模组相比血清中OVA特异性IgE和总IgE的浓度显著性升高。  

哮喘小鼠模型H&E染色病理分析

哮喘小鼠模型肺部H&E染色分析。结果显示：与G1未造模组相比，G2造模组动物肺脏镜下均表现出血管及支气管周围混合炎细胞浸润(b)和部分支气管中黏液(a)形成的哮喘相关病理性改变。以上结果证明OVA能成功诱导野生型C57BL/6小鼠建立哮喘模型。

哮喘小鼠模型（BALB/c）用于评价皮质类固醇类免疫抑制剂地塞米松的药效

哮喘小鼠模型肺泡灌洗液（BALF）中免疫细胞的数量

使用OVA在野生型BALB/c小鼠中诱导哮喘模型。（A）BALF 中CD45+细胞的数量；（B）BALF 中嗜酸性粒细胞的数量；（C）嗜酸性粒细胞占CD45+细胞的比例。结果显示：经OVA致敏和激发后，G2造模组小鼠的白细胞数量与G1未造模组相比显著增加，其嗜酸性粒细胞的数量与比例都有显著增加，提示造模成功。给予不同浓度的地塞米松（Dex）后，其CD45阳性细胞和嗜酸性粒细胞与G2造模组相比显著性降低。

哮喘小鼠模型血清中的IgE水平

哮喘小鼠模型血清中IgE水平的检测。实验终点取血清，使用ELISA检测OVA特异性IgE和总IgE的浓度。（A）血清中OVA 特异性IgE的浓度。（B）血清中总IgE的浓度。结果显示：G2造模组与G1未造模组相比血清中OVA特异性IgE和总IgE水平显著性增加，提示造模成功。给予不同浓度地塞米松（Dex）后其特异性IgE和总IgE水平与G2造模组相比显著性降低，且缓解程度呈现一定的剂量依赖性。

H&E染色病理分析

哮喘小鼠模型肺部H&E染色分析。结果显示G1未造模组肺部气道未见炎症反应。G2造模组的血管及支气管周围炎症显著增加，粘液分泌水平增加，提示造模成功。G3-G6给药组给予不同浓度地塞米松后,小鼠炎症浸润和黏液分泌减少。以上结果证明OVA诱导的小鼠哮喘模型能成功用于验证皮质类固醇类免疫抑制剂的药效。

哮喘小鼠模型（B-hIL4/hIL4RA）用于评价抗人IL4RA抗体药物dupilumab的药效

哮喘小鼠模型肺泡灌洗液（BALF）中免疫细胞的数量

使用OVA在B-hIL4/hIL4RA小鼠中诱导哮喘模型。（A）BALF 中CD45+细胞的数量。（B）BALF 中嗜酸性粒细胞的数量。（C）嗜酸性粒细胞占CD45+细胞的比例。结果显示：经OVA致敏和激发后，G2造模组小鼠的白细胞浸润与G1未造模组相比显著增加，其嗜酸性粒细胞含量显著增加，提示造模成功。给予dupilumab (内部合成) 后，其CD45+细胞和嗜酸性粒细胞的数量与G2造模组相比显著降低。

哮喘小鼠模型血清中IgE水平

哮喘小鼠模型血清中IgE水平的检测.实验终点取血清，使用ELISA检测OVA特异性IgE和总IgE水平。（A）血清中OVA 特异性IgE水平。（B）血清中总IgE水平。结果显示：G2造模组与G1未造模组相比OVA特异性IgE和总IgE水平显著增加，提示造模成功。给予dupilumab (内部合成) 药物后其特异性IgE和总IgE水平与G2造模组相比显著性降低。

H&E染色病理分析

哮喘小鼠模型肺部H&E染色分析。结果显示G1未造模组肺部气道未见炎症反应。G2造模组的血管及支气管周围炎症(b)显著增加，粘液(a)分泌水平增加，提示造模成功。G3给药组显示经dupilumab（内部合成）治疗的小鼠炎症浸润和粘液分泌减少。以上结果证明OVA能成功在B-hIL4/hIL4RA小鼠中建立哮喘模型用于药效评价。

相关产品列表：

参考文献：

1. Gandhi, N.A. et al. Targeting key proximal drivers of type 2 inflammation in disease. Nat Rev Drug Discov 15, 35-50 (2016).

2. Pelaia, G., Vatrella, A. & Maselli, R. The potential of biologics for the treatment of asthma. Nat Rev Drug Discov 11, 958-972 (2012).