非酒精性脂肪性肝炎（NASH）模型介绍

非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)是一种脂肪在肝脏中过度累积的疾病。这种脂肪堆积不是由大量饮酒引起的。非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic steatohepatitis, NASH)是NAFLD的一种，除肝脏脂肪堆积外，还有肝炎、肝细胞损伤、纤维化及肝脏瘢痕形成的病理变化，进而可能导致肝硬化或肝癌。NASH进展的机制仍不清楚，目前还缺乏有效的治疗方法。

NASH的临床症状相当复杂，根据疾病过程包括肥胖、胰岛素抵抗、脂肪性肝炎、肝细胞气球样变和纤维化。临床前实验中经常使用的NASH模型有遗传动物模型、饮食诱导的动物模型及遗传与饮食诱导相结合构建的动物模型。然而，很难在短时间内模拟人类疾病的所有发病特征。

为了解NASH发生、发展的致病机制并开发创新疗法，我们开发了几种NASH不同发病阶段的小鼠模型。

• 西方饮食（WD）：饮食成分中高脂、高果糖和高胆固醇，该饮食诱导的NASH模型发展为肥胖、糖耐量受损和肝脏脂肪变性。
• 高脂肪蛋氨酸胆碱缺乏饮食（HFMCD）：饮食成分中含有60 kcal%脂肪，蛋氨酸、胆碱缺乏，该饮食诱导的NASH模型显示出肝损伤、肝脂肪变性和纤维化增加，伴随NAS评分增加。
• 四氯化碳(CCl4)注射：引起明显的肝脏炎症和纤维化。虽然很难获得完美的模型，但根据目标特点选择目前可用的合适模型是一个很好的选择。

饮食和化学诱导的NASH小鼠模型比较

高脂肪蛋氨酸胆碱缺乏饮食(HFMCD)诱导的NASH小鼠模型

HFMCD饮食是NASH的经典饮食模型。尽管饲料中含60 kcal%脂肪，但缺乏蛋氨酸和胆碱。蛋氨酸和胆碱都能促进脂肪以磷脂的形式由肝脏通过血液输送出去，提高脂肪酸在肝中的利用，防止脂肪在肝脏的异常堆积。

高脂肪蛋氨酸胆碱缺乏饮食（HFMCD）诱导的NASH模型。将野生型C57BL/6J小鼠随机分为4组，分别给予标准饲料（STD）和高脂肪蛋氨酸胆碱缺乏（HFMCD）饲料并喂养4周及6周后检测各项指标。(A)HFMCD诱导NASH模型方案图；(B)小鼠体重；(C)肝脏重量；(D)肝脏重量与体重的比值；(E-F)血清ALT、AST浓度；(G-H)肝组织切片HE染色及NAS评分；(I-J)肝组织切片天狼星红染色及肝纤维化程度统计。结果显示：HFMCD诱导组与STD组相比，肝脏重量明显增加；血清ALT、AST浓度显著升高；肝组织切片HE染色显示广泛的肝细胞脂肪变性、气球样变和小叶内炎症；肝组织天狼星红染色显示明显的肝纤维化。以上结果说明HFMCD诱导能成功建立NASH小鼠模型。数据为平均值±SEM，n = 5。

参考文献

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