Orthotopic Liver Cancer Model

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实验结果

实验结果

肝癌原位模型：B-luc Hep 3B 在 B-NDG 小鼠中的应用

Study ID:	Groups	Animal strain	Sex	Cell line	The amount of cells Inoculated	The Volume of cells	Animal number	Remarks
TT02110	-	B-NDG mice	F	B-luc Hep 3B #1-A06	5×10⁵	0.02ml/mice	10	-

B-luc Hep 3B (plus) + B-NDG mice (orthotopic) img

肝癌原位模型的构建。
为构建肝癌模型，取 20 微升 B-luc Hep 3B 细胞悬液（细胞数 5×10⁵个），注射至 B-NDG 小鼠（雌性，每组 10 只）的肝左外叶。每周记录小鼠的体重及肿瘤荧光信号变化。结果显示，随时间推移，小鼠体内肿瘤荧光信号逐渐增强，体重则出现轻微下降。这表明该细胞株已成功构建为肝癌原位移植瘤模型。

肝癌原位模型的 Micro-CT 成像

B-luc Hep 3B (plus) + B-NDG mice (orthotopic) img 2

基于显微计算机断层扫描（Micro-CT）的肝癌原位模型影像学分析。
影像学结果显示，造影剂注射后，小鼠肝脏组织密度增高，在影像上呈现为高密度（深棕色）阴影；而肿瘤组织几乎不摄取造影剂，表现为低密度阴影。A：对 B-NDG 小鼠接种 B-Luc-Hep 3B 细胞建立的肝癌原位模型，于接种后第 14 天进行 Micro-CT 扫描，图像为小鼠腹部冠状面。结果可见，随时间推移，肝脏区域的低密度阴影（肿瘤组织）体积逐渐增大。B：通过增强 CT 扫描数据绘制肿瘤生长曲线。C：B-Luc-Hep 3B 肝癌原位模型小鼠的体重变化趋势。

肝癌原位模型的疗效评估

Study ID:	Groups	Animal number	Treatment	Dosage（mg/kg）	Lot No.	Dosing Volume	Dosing Route	Treatment Schedule	Treatment Times
21P079544	G1	6	0.9% saline solution	-	2106261604	10μL/g	i.p.	QW	4
21P079544	G2	6	fluorouracil	60mg/kg	2110151	10μL/g	i.p.	QW	4

B-luc Hep 3B (plus) + B-NDG mice (orthotopic) img 3

肝癌原位模型的药效评价。取 B-NDG hIL-15 小鼠（雌性，每组 10 只），接种 20 微升细胞悬液（细胞数 5×10⁵个）。肿瘤接种后第 5 天，依据活体成像信号值将小鼠随机分为 0.9% 生理盐水对照组与氟尿嘧啶给药组。每周记录小鼠的体重及肿瘤荧光信号变化。结果显示，60 毫克 / 千克剂量的氟尿嘧啶可显著抑制 B-luc Hep 3B 肝癌原位移植瘤的生长，表明该模型可有效用于临床前药效评价。实验结束后对小鼠进行解剖，苏木精 - 伊红（H&E）染色结果显示，肿瘤已转移至胰腺、胃及脾脏组织。

肝免疫重建模型的疗效评估

Study ID:	Groups	Animal number	Treatment	Dosage（mg/kg）	Lot No.	Dosing Volume	Dosing Route	Treatment Schedule	Treatment Times
22P122201	G1	6	PBS	-	2428708	5μL/g	i.v.	QW	4
22P122201	G2	6	Positive control	0.5mg/kg	2022105025	5μL/g	i.p.	Q2D	10

肝癌原位免疫重建模型的药效评价。对 B-NDG 小鼠静脉注射人外周血单个核细胞（PBMC，5×10⁵个 / 0.2 毫升 / 只），第 4 天时于小鼠肝脏接种 20 微升 B-luc Hep 3B 细胞悬液（5×10⁶个 / 0.02 毫升 / 只）。实验第 0 天，依据平均成像信号值及人源 CD45 阳性细胞比例（hCD45%）将小鼠随机分为两组，每周记录小鼠的体重及肿瘤荧光信号变化。结果显示，阳性对照药可显著抑制免疫重建后肝癌原位移植瘤的生长，且小鼠体重随时间推移仅出现轻微下降，表明该模型可有效用于临床前药效评价。

肝癌原位模型：B-Tg(Luc-EGFP) Hep G2 在 B-NDG 小鼠中的应用

Evaluation of the efficacy of orthotopic liver immune reconstitution model 2

建立肝癌原位模型。
为了建立肝癌模型，将 B-Tg(Luc-EGFP) Hep G2 细胞悬液注射到 B-NDG 小鼠左侧肝叶，并每周记录小鼠的体重和肿瘤荧光信号。结果表明，荧光信号逐渐增加。右面板显示了肝肿瘤的 H&E 染色结果。此表明该细胞系成功构建为肝癌原位肿瘤模型。

Evaluation of the efficacy of orthotopic liver immune reconstitution model 3

建立肝脏转移模型。为了建立肝脏转移模型，将 100 μL B-hPD-L1 MC38 细胞悬液（5×10⁵，1×10⁶）注射到 B-NDG 小鼠的脾脏，每周记录小鼠的体重和肿瘤荧光信号。结果表明，荧光信号逐渐增加。此表明该细胞系成功构建为肝脏转移模型。

Study ID:	Groups	Animal number	Treatment	Dosage (mg/kg)	Lot No.	Dosing Volume	Dosing Route	Treatment Schedule	Treatment Times
24P071531	G1	6	PBS	-	2933643	10μL/g	i.v.	QW	2
	G2	6	DS-8201	3mpk	394042	10μL/g	i.v.	QW	2
	G3	6	DS-8201	6mpk	394042	10μL/g	i.v.	QW	2

DS-8201 可显著抑制 B-NDG 小鼠体内 B-Tg (Luc-EGFP) Hep G2 肿瘤的生长。将 5×10⁵个 Hep G2 细胞与基质胶按 1:1 比例混合后，原位接种至雌性 B-NDG 小鼠（8 周龄，每组 6 只）。当活体成像信号值达到约 2.7×10⁸光子 / 秒时开始给药，给药方案详见上图。实验数据以平均值 ± 标准误表示。

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