自身免疫性与炎症性疾病

多发性硬化症（EAE）小鼠模型

百奥赛图已构建由髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠模型。该模型是经验证的临床前多发性硬化症（MS）模型，可再現人类多发性硬化症的关键病理特征，包括中枢神经系统炎症、脱髓鞘及运动功能损伤。这种自身免疫性疾病模型，为临床前多发性硬化症研究、机制探索，以及多发性硬化症相关治疗与免疫调节疗法的疗效评估，提供了可靠的在体平台。
Multiple Sclerosis (EAE)

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  • 实验结果

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    多发性硬化症（EAE）小鼠模型介绍

    多发性硬化症（MS）是一种累及中枢神经系统（CNS）的慢性自身免疫性炎症疾病，会引发脑炎、脱髓鞘及进行性神经功能障碍。其临床症状包括肌肉僵硬与瘫痪、视觉障碍、感觉丧失及共济失调，且常以反复发作的形式出现。在多发性硬化症的各类动物模型中，实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型应用最为广泛 —— 因其能高度再現人类多发性硬化症中观察到的病理性炎症与脱髓鞘特征。

    在啮齿类动物中，尤其是实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠模型与 EAE 大鼠模型，可通过脊髓匀浆、纯化髓鞘蛋白（如髓鞘碱性蛋白 MBP、蛋白脂质蛋白 PLP 或髓鞘少突胶质细胞糖蛋白 MOG）实现疾病诱导。这些抗原会激活髓鞘特异性 T 细胞，此类细胞穿过血脑屏障后，会启动炎症级联反应，进而导致轴突损伤、脱髓鞘及运动功能丧失。EAE 模型的疾病进展通常通过标准化临床评分，以及对局部脱髓鞘和中枢神经系统（CNS）炎症的组织病理学分析来评估。

    百奥赛图已构建由髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠模型。该模型是经验证的临床前多发性硬化症（MS）模型，非常适合用于药物疗效评估、机制研究及免疫调节疗法研发。这类 EAE 模型为研究自身免疫性神经炎症、推进多发性硬化症相关治疗方法的研发，提供了可靠的在体平台。

    实验结果
    MOG35-55诱导EAE的方案

    造模方法： 动物在第0天接收MOG35-55/CFA乳剂（皮下注射）在侧腹部（蓝点）或颈部和臀部（红点），并在MOG35-55/CFA乳剂注射后2小时和24小时分别注射PTX（腹腔注射）。记录体重和EAE评分，每2天记录一次。在实验结束时收集脊髓的腰部扩大部分，进行H&E和LFB染色。

    Protocol of MOG35-55 induced EAE

    实验动物： C57BL/6，B-hCD40hFcRn小鼠，8-10周，雌性
    检测指标： 体重和临床评分（每两天）H&E，Luxol Fast Blue（LFB）染色

    Readout
    Included tests Phenotype Body weight
    Clinical score
    Histopathology H&E; LFB
    Optional tests Tissue homogenate Cytokines analysis
    Peripheral blood flow cytometry Flow cytometry assay
    Score Symptoms Description
    0 Normal Hold mouse by the base of the tail. Unaffected, mouse can "helicopter" tail.
    0.5 Tail limpness Hold mouse by the base of the tail. Some loss of tail tone.
    1 Hold mouse by the base of the tail. Complete tail limpness, with no evidence of limb weakness.
    1.5 Limpness No hind limb paralysis, but the hind limbs fail when ambulating on the lid metal grid.
    2 Gait irregularities. Hold mouse by the base of the tail, the hind limbs are curled up.
    Or mouse's head is tilted, it can't keep balance with no hind limb paralysis.
    2.5 Hind limbs paralysis Partial paralysis of hind limbs, waddles upon ambulation, but does not drag limbs.
    Or mouse's head is tilted, and it keep fall down with no hind limb paralysis.
    3 Partial paralysis of hind limbs as evidenced by dragging one limb upon ambulation.
    3.5 Forelimbs paralysis Complete paralysis of both hind limbs, dragging body by forearms, still capable of moving around the cage.
    4 Responsive but not moving/stationary, listless, rapid breathing (consult institutional veterinarian, consider euthanasia).
    4.5 Dead Immobile and unresponsive, moribund (immediate euthanasia recommended).
    5 -
    MOG35-55诱导的C57BL/6小鼠EAE模型
    MOG35-55 induced EAE In C57BL/6 mice
    Group Onset (day) Peak (day) Incidence
    G1:
    C57BL/6J    		 12 16 5/5
    12 16
    14 17
    12 16
    12 16
    G2:
    C57BL/6N    		 14 18 5/5
    12 14
    14 18
    14 16
    14 18

    图1. MOG35-55诱导的EAE模型。 C57BL/6J和C57BL/6N（A，B）小鼠在第0天接受MOG35-55乳剂注射（皮下注射）在颈部和臀部（C）。MOG注射后2小时和24小时给予PTX（腹腔注射）。每2天记录一次体重和临床评分。数据以均值±标准误（SEM）表示，n=5。

    抗人CD40抗体在B-hCD40/hFcRn小鼠EAE模型中的药效评估
    Efficacy evaluation of the anti-human CD40 in B-Hcd40/hFcRn mice of EAE model

    抗CD40抗体对MOG35-55诱导EAE模型的药效评估。 小鼠在第0天接收MOG35-55乳剂注射（皮下注射）在侧腹部（蓝点）。MOG注射后2小时和48小时给予PTX（腹腔注射）。在第0、4和8天给予同种型对照或抗CD40抗体。 (A) 体重 (B) 和临床评分 (C) 每两天记录一次。通过H&E和LFB染色评估脊髓的免疫细胞浸润和脱髓鞘（D）。数据以均值±SEM表示，n=5，与G2比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。

    CD40L抗体缓解B-hCD40/CD40L小鼠中MOG35-55诱导的EAE模型症状
    CD40L-Ab alleviated MOG35-55 induced EAE in B-hCD40/CD40L mice
    CD40L-Ab alleviated MOG35-55 induced EAE in B-hCD40/CD40L mice 2

    抗CD40L抗体对MOG35-55诱导EAE模型的药效评估。 小鼠在第0天接收MOG35-55乳剂注射（皮下注射）在颈部和臀部（红点）。MOG注射后2小时和48小时给予PTX（腹腔注射）。同种型对照组（G3）或抗CD40L抗体组（G4）每两周给予一次。记录体重（A）和临床评分（B），每两天记录一次。数据以均值±SEM表示，与G2比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。

    B-hCD40/CD40L小鼠EAE模型中的LFB和H&E染色
    LFB and H&E staining in mouse (B-hCD40/CD40L) EAE model

    抗CD40L抗体（类似物，内部制备）可改善EAE临床症状，并控制炎症和脱髓鞘。
    在第30天从B-hCD40/hCD40L小鼠取出脊髓并分别用Luxol Fast Blue（LFB）（A）或Hematoxylin和Eosin（H&E）（B）进行染色。显示了代表性切片。脊髓的炎症细胞和脱髓鞘评分（C&D）。数据以均值±SEM表示，与G2比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。

    MOG35-55诱导的B-hCD40/CD40L小鼠EAE模型中的细胞因子分析
    Cytokines analysis in MOG35-55 induced EAE in B-hCD40/CD40L mic

    抗CD40L抗体对MOG35-55诱导EAE模型的药效评估。小鼠在第0天接收MOG35-55乳剂注射（皮下注射）在颈部和臀部（红点）。MOG注射后2小时和48小时给予PTX（腹腔注射）。同型对照组或抗CD40L抗体组每两周给予一次。实验终点收集血清并评估细胞因子水平。数据以均值±SEM表示，n=6，与G2比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。