RenMice-抗体发现引擎

RenNano®

RenNano小鼠可产生无需体外人源化的重链抗体（HCAbs），加快研发进程并降低成本。RenNano来源的重链抗体具有良好的序列多样性、优异的亲和力及理想的药代动力学（PK）特性。

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    RenNano的主要特点
    1. 完整的人类重链可变区域和修饰的恒定区
    2. RenNano小鼠对多个抗原表现出强大的免疫反应

    RenNano小鼠针对TFR1、4-1BB和ALB的免疫反应评估：RenNano小鼠经TFR1和4-1BB（膜性抗原）免疫后采集血清，稀释后与表达目标抗原的CHO细胞共孵育。使用荧光染料标记的二抗检测CHO细胞结合的重链抗体（HCAbs），并通过流式细胞术测定平均荧光强度（MFI），以指示抗原特异性HCAb的滴度。针对ALB（分泌型抗原）免疫的小鼠血清经稀释后与荧光标记的二抗孵育，通过ELISA测定OD450值，以指示抗原特异性HCAb的滴度。

    3. RenNano来源的抗原特异性HCAbs显示出高度多样性

    RenNano小鼠来源的HCAbs具有高度多样性，并且许多包含较长的CDR3区域。通过重链种系基因使用情况和CDR3长度对抗原特异性重链抗体（HCAbs）进行分析。结果显示HCAbs具有广泛的IGHV种系多样性，且大多数CDR3长度超过12个氨基酸，部分超过17个氨基酸。

    验证数据

    通过表面等离子共振（SPR）技术检测了68个针对8个靶点（4-1BB、TROP2、IL3RA、OX40、Nectin-4、ROR1、PSMA 和 DLL3）的RenNano来源的HCAbs的亲和力。对于大多数HCAbs，KD值在10-6 ~ 10-10 M范围内。

    RenNano小鼠的B细胞发育和分化特征。RenNano小鼠在外周淋巴器官（脾脏 [SP] 和淋巴结 [LN]）中的B细胞比例与野生型（WT）小鼠或RenMab小鼠相当。其脾脏中滤泡B细胞（FO-B）和边缘区B细胞（MZ-B）的比例也与WT小鼠或RenMab小鼠接近。

    RenNano HCAbs的理化性质分析。RenNano HCAbs在一步纯化后显示出高纯度（A）。HCAbs在疏水相互作用高效液相色谱（HIC-HPLC）和阳离子交换高效液相色谱（CIC-HPLC）中保留时间较短，显示出优异的亲水性和特异性（图B、C）。此外，RenNano HCAbs还具有良好的热稳定性（图D）。