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2026年ASCO年会数据显示，In Vivo CAR-T正在从技术验证进入临床验证阶段。该方向的核心价值，是在体内直接生成CAR-T细胞，从而简化传统CAR-T的体外制备流程。
公开信息显示，Kelonia Therapeutics的KLN-1010在复发/难治性多发性骨髓瘤患者中取得早期临床研究结果。18例接受治疗患者中，MRD阴性缓解率达到100%，部分患者缓解持续时间超过9个月。该治疗无需淋巴清除预处理，可支持门诊给药。CRS事件均为1–2级，仅观察到1例3级ICANS，且经治疗后快速恢复。
EsoBiotec公布的ESO-T01也显示出体内生成BCMA CAR-T细胞的临床可行性。该项目基于慢病毒递送平台，部分患者在单次给药后观察到骨髓肿瘤细胞清除及缓解现象。
图1: In Vivo CAR-T 疗法的部分研究情况[1]
根据Novotech预测，到2028年，In Vivo CAR-T市场规模有望达到25亿美元，潜在适用患者数量可达200万人[2]。
图2: In Vivo CAR-T 疗法的市场前景[2]
当前获批的CAR-T产品多采用Ex Vivo模式。该模式需要采集患者T细胞，在体外完成CAR构建、扩增和质控，再回输至患者体内。
Ex Vivo CAR-T已验证治疗价值，但仍面临多项挑战：
In Vivo CAR-T的目标，是在患者体内直接完成T细胞工程化改造。其通过LNP、慢病毒或AAV等递送系统，将CAR编码元件递送至T细胞，在体内原位生成CAR-T细胞。
图3: In Vivo CAR-T疗法的优势[3]
如果该模式持续成熟，CAR-T有望从高度个体化的细胞治疗，进一步向标准化、规模化药物平台发展。
In Vivo CAR-T的研发重点，正在从单纯的CAR结构设计，扩展至递送系统工程。
目前主要有两类递送路线。
第一类是病毒载体递送。慢病毒载体具有较高转导效率，并已有CAR-T研发经验积累。ESO-T01即采用慢病毒体内递送策略。
第二类是LNP递送。LNP具备模块化设计能力，适合规模化生产，并可避免病毒整合相关风险。通过表面修饰，LNP可实现对CD8等T细胞亚群的靶向递送。
图4：In Vivo CAR-T的两类递送系统[1]
无论采用哪种路线，核心问题都是：递送系统能否精准进入目标T细胞，并在体内产生稳定、可控的CAR表达。
在传统CAR-T研究中，动物模型主要用于药效验证。
在In Vivo CAR-T研究中，动物模型还需要回答递送相关问题：
递送是否具有T细胞靶向性
转导是否发生在目标细胞
CAR表达是否稳定
是否存在非目标细胞递送
体内CAR-T是否持续扩增
长期免疫安全性是否可控
因此，In Vivo CAR-T临床前研究通常需要两类模型：
一类是靶点人源化模型，用于递送系统开发与机制验证；
另一类是人免疫系统重建模型，用于药效和安全性研究。
图5: CAR相关疗法的模型选择策略
图6: 百奥赛图部分相关动物模型
CD8是当前In Vivo CAR-T递送开发中的重要靶点之一。
百奥赛图B-hCD8 mice（产品编号：112811）通过将小鼠Cd8a/Cd8b1胞外区替换为人源CD8A/CD8B，实现人CD8在完整免疫系统中的稳定表达。
(A) B-hCD8小鼠脾脏中稳定表达人源CD8分子。
(B) B-hCD8小鼠PBMC中CD8表达水平与人PBMC高度接近（ABC分析，n=3）。
(C) B-hCD8小鼠脾脏中的白细胞亚群分布与野生型小鼠相似（n=3）。在外周血和淋巴结中也观察到一致结果，说明人源CD8表达不影响小鼠正常免疫系统的发育与稳态维持。
与传统人免疫系统重建模型相比，该模型保留完整免疫系统背景，免疫细胞组成更加稳定，不受供体差异影响，更适合用于递送系统开发阶段的大规模验证研究。
CD8-tLNP在B-hCD8小鼠中实现对CD8+ T细胞的高效、特异性递送。分离小鼠脾细胞并经CD8-tLNP-EGFP处理24小时后进行流式分析。
(A) 各免疫细胞亚群中的EGFP表达。
(B) EGFP阳性细胞比例统计。
(C) 各免疫细胞亚群中的CD8表达水平。
CD8-tLNP在B-hCD8小鼠体内实现对CD8+ T细胞的优先递送。静脉注射CD8-tLNP-EGFP 24小时后进行流式检测（n=1）。
(A) 不同免疫细胞亚群中的EGFP表达。
(B) EGFP阳性细胞比例统计。
在功能验证实验中，CD19 CAR mRNA-LNP单次给药后，小鼠外周血B细胞比例持续下降，并在Day 25仍观察到明显B细胞清除效应，提示体内生成的CAR-T细胞具备持续功能活性。
CD8-tLNP递送CD19 CAR可在B-hCD8小鼠体内有效诱导B细胞清除。单次给药后持续监测外周血B细胞变化（n=9）（客户数据）[4]。
(A) B细胞比例变化。
(B) B细胞总数变化。
CD8-tLNP（CD19 CAR）改善B-hCD8实验性自身免疫性心肌炎（EAM）模型疾病表型。在疾病建立后给予CD8-tLNP治疗（n=3），给药1周后评估症状、肌力及肌肉功能变化（客户数据）[4]。
(A) 一般症状评分。
(B) 肢体握力。
(C) 血浆CK水平。
(D-E) 肌肉收缩功能。
除递送验证外，In Vivo CAR-T还需要在人源免疫环境中评估药效、扩增和持续性。
百奥赛图可提供多种人免疫系统重建模型，用于In Vivo CAR-T临床前评价。
PBMC+B-Luc Hep3B plus+B-NDG mice（产品编号：110586）原位肝癌模型用于LNP-mRNA药效评价。在百奥赛图B-NDG小鼠中完成人PBMC免疫重建后建立Hep3B-luc原位肝癌模型，阳性对照药物表现出显著抑瘤效果，证明该模型能够有效支持In Vivo CAR-T及LNP递送疗法的临床前研究。
PBMC+B-Nalm6-luc+B-NDG MHC I/II DKO mice（产品编号：111895）白血病模型用于Lentiviral In Vivo CAR-T药效评价。在百奥赛图B-NDG MHC I/II DKO小鼠中进行人PBMC免疫重建后建立Nalm6-luc急性B淋巴细胞白血病模型，采用慢病毒介导的In Vivo CAR-T进行治疗。结果显示，治疗组肿瘤负荷显著下降，证实体内生成的CAR-T具有明确的抗肿瘤活性。此外，在实验终点检测外周血CAR-T细胞扩增情况发现，给药组均可检测到CAR-T细胞，且CAR-T细胞比例和绝对数量较PBS对照组明显升高，并呈现一定剂量依赖趋势，进一步验证了慢病毒载体能够在体内有效转导并持续产生功能性CAR-T细胞。
B-Tg(CAG-Luc-EGFP)NALM6+huHSC-B-NDG hIL15 mice（产品编号：112478）白血病模型用于LNP In Vivo CAR-T药效评价。在百奥赛图huHSC-B-NDG hIL15人源化小鼠中接种B-Tg(CAG-Luc-EGFP)NALM6白血病细胞后，给予CD8-tLNP（CD19 CAR）治疗。结果显示，治疗组肿瘤负荷显著下降并得到持续控制，表明LNP介导的In Vivo CAR-T具有良好的体内抗白血病活性，验证了该模型可有效支持In Vivo CAR-T药物的临床前药效研究。
LNP介导的In Vivo CAR-T在huHSC-B-NDG hIL15 mice模型中实现高效B细胞清除。单次给予CD8-tLNP（CD19 CAR）后，外周血人源B细胞（hCD19+/hCD20+）比例及数量迅速下降，表明体内生成的CAR-T具有显著生物学活性。
(A) B细胞比例变化。
(B) B细胞数量变化。
百奥赛图模型体系可支持递送靶向性、CAR表达、体内扩增、肿瘤清除和免疫相关安全性评价，为In Vivo CAR-T临床前研究提供模型基础。
参考资料：
[1] Gao Y, Hu J, An N, et al. In vivo engineering of CAR-T cells: delivery strategies and clinical translation. Biomarker Research, 2026. DOI: 10.1186/s40364-026-00899-y.
[2] https://novotech-cro.com/sites/default/files/2025-09/WP_202505_In-Vivo-CAR-Therapies-Sep18.pdf
[3] Bui TA, Mei H, Sang R, et al. Advancements and challenges in developing in vivo CAR T cell therapies for cancer treatment. EBioMedicine, 2024, 106:105266. DOI: 10.1016/j.ebiom.2024.105266.
[4] SHENZHEN MAGICRNA BIOTECHNOLOGY CO., LTD. Targeted lipid nanoparticle compositions and uses thereof for in vivo CAR-T cell generation. Patent WO2026012294A1, 2026.
