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2026年6月22日，默克宣布tulisokibart在III期ATLAS-UC诱导研究中达到主要终点和关键次要终点[1]。这代表anti-TL1A赛道进入重要III期注册验证阶段。TL1A受到关注，不仅因为其参与炎症反应。更关键的是，TL1A同时连接IBD中的炎症和肠道纤维化。对于IBD中后期患者，胶原沉积、肠壁增厚和管腔狭窄，是疾病进展中的重要问题[2]。
B-hTL1A/hIL23A/hIL12B人源化小鼠由百奥赛图构建。该模型同时完成人TL1A、IL23A和IL12B基因替换，可用于anti-TL1A、anti-IL-23p19及IL-12/23p40相关抗体药物的临床前评价。Spyre Therapeutics的SKYLINE-UC试验正在评估anti-TL1A与anti-IL-23的单药和联合疗法。相关研究中使用了百奥赛图B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠[3]。当anti-TL1A与IL-23/IL-12多靶策略叠加时，能否验证协同药效，首先取决于合适的体内模型。
现有IBD生物制剂多聚焦炎症信号。常见靶点包括TNF-α、整合素、IL-12和IL-23等。但IBD进展到中后期后，病理改变并不只来自炎症。反复黏膜损伤可触发成纤维细胞活化。胶原蛋白持续沉积后，可导致肠道狭窄和纤维化进展[2]。TL1A正好连接两类病理过程。在免疫层面，TL1A通过DR3受体传递共刺激信号，增强Th1和Th17相关免疫反应，并促进IFN-γ和IL-17产生[4]。在纤维化层面，Jacobi等人在Scientific Reports发表研究，证明TL1A-DR3在成纤维细胞中的直接信号，可在体内诱导肠道纤维化[2]。因此，TL1A具有“抗炎+抗纤维化”的双重研究价值。
图1：TL1A通路机制——TL1A介导炎症与纤维化的双重病理
IL-23由p19和p40两个亚基组成。其中，p19由IL23A编码，p40由IL12B编码。p40同时也是IL-12的组成亚基。树突细胞和巨噬细胞受抗原刺激后，可释放IL-23。随后，IL-23促进Th17细胞活化，并驱动IL-17A、IL-17F、IFN-γ和TNF等炎症因子产生。2006年，GWAS研究将IL23R确定为IBD相关易感基因之一[5]。这提示IL-23轴在肠道免疫中具有重要作用。TL1A与IL-23通路存在交叉，但并不完全重叠。TL1A更偏向免疫启动和纤维化调控。IL-23则参与Th17炎症效应放大。二者联合阻断，具备覆盖不同炎症亚群的研究价值。
图2. IL-23的作用机制：Th17介导的慢性炎症性疾病
IL-23是由p19（IL23A编码）和p40（IL12B编码）组成的异源二聚体，p40同时也是IL-12的组成亚基。这个共享结构意味着：靶向p40的抗体（Ustekinumab）同时阻断IL-12和IL-23，靶向p19的抗体（Risankizumab、Guselkumab）则选择性阻断IL-23。人源化IL23A只覆盖p19靶点，人源化IL12B才覆盖p40靶点——两者都做，这个模型才能同时评价anti-p19和anti-p40两类药物。B-hTL1A/hIL23A/hIL12B（Cat# 113038）在C57BL/6背景下完成了TL1A、IL23A和IL12B三个基因的人源化替换，使得单个模型可同时评价anti-TL1A、anti-IL-23p19（如Risankizumab）和anti-IL-12/23p40（如Ustekinumab）三类抗体药物。
图3A：B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠mRNA表达验证（RT-PCR）
通过RT-PCR对野生型C57BL/6小鼠和B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠中TL1A、IL23A和IL12B基因表达进行物种特异性分析。人源 TL1A、IL23A、IL12B mRNA 仅在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠（H/H）小鼠结肠和肺组织中检出，野生型（WT）小鼠仅表达鼠源转录本。结果表明三个基因的人源化替换均在 mRNA 水平成功，且具有组织特异性。
图3B：人TL1A蛋白ELISA检测
通过ELISA分析B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠中可溶性TL1A的表达。BMDC 经 LPS 刺激后，可溶性人 TL1A 蛋白仅在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠（H/H）培养上清中检测到，WT 小鼠未检出。确认人源 TL1A 蛋白可被正常分泌。
图3C：人IL-23蛋白ELISA检测
通过ELISA分析野生型C57BL/6小鼠和B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠中品系特异性IL-23的表达。BMDC 经 LPS 刺激后，人 IL-23（p19+p40）蛋白仅在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠（H/H）培养上清中特异性分泌，WT 小鼠对应位置无信号。确认人源 IL-23 异源二聚体可正常组装和分泌。
流式分析脾脏、血液、淋巴结各白细胞亚群——T、B、NK、DC、单核、巨噬和中性粒细胞比例与WT无差异，CD4+/CD8+/Treg分布正常。四时间点（8/16/24/32周）血液学和血生化全部正常。32周主要脏器H&E无异常。雌雄0-32周体重曲线与WT重合。
上述数据表明，三基因人源化替换未对免疫系统发育、造血功能、代谢指标及主要脏器组织形态产生可检测的影响。该模型在生理状态下与野生型小鼠无显著差异，具备作为临床前药效评价工具的可靠性。
图4A：TNBS急性结肠炎——体重变化与DAI评分、结肠长度与重量
抗人TL1A和抗人IL23p19抗体在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠TNBS诱导的急性结肠炎模型中的治疗效果。将TNBS溶液灌注至B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠（雌性，8-10周龄，n=8）的结肠腔内。对照组（假手术组）接受50%乙醇的直肠注射。实验组分别接受抗人TL1A抗体Tulisokibart（10 mpk，由外部提供）、抗人IL23p19抗体Risankizumab（10 mpk，由外部提供）单药或联合治疗。（A）体重变化。（B）DAI评分。(C) 结肠指数。(D) 结肠照片。在BβhTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠中建立了TNBS诱导的急性结肠炎模型，给予抗人TL1A抗体Tulisokibart和抗人IL23p19抗体Risankizumab有效改善了TNBS诱导的急性结肠炎，二者联合使用疗效更佳。数值以均值 ± 标准误 (SEM) 表示。*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001，与溶剂对照组相比，采用方差分析 (ANOVA)。
图4B：TNBS诱导急性结肠炎模型中H&E染色与Masson染色
在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠的TNBS诱导急性结肠炎模型中进行H&E染色Masso染色。TNB溶液灌注至BhTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠（雌性，8-10周龄，n=8）的结肠腔内；对照组（假手术组）接受直肠内注射50%乙醇；治疗组单独或联合使用抗人TL1A抗体Tulisokibart（10 mpk，由WuXi AppTec提供）及抗人IL23p19抗体Risankizumab（10 mpk，由外部提供）。(A)病理评分；(B)Masson染色评分。研究证实 TNBS 可成功建立B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠的急性结肠炎模型，给予抗人TL1A抗体Tulisokibart和抗人IL23p19抗体Risankizumab均能有效改善 TNBS 诱导的急性结肠炎小鼠的结肠病理损伤及纤维化进展，联合用药效果更显著。数据以均值±标准误表示。*p<0.05、**p<0.01、***p<0.001、****p<0.0001（与溶剂组相比，方差分析）。
注：本实验由外部使用B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠完成。
图5A：TNBS诱导慢性结肠炎模型的体重变化和DAI评分分析
抗人TL1A和抗人IL23p19抗体在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠TNBS诱导的慢性结肠炎模型中的治疗效果。在第0天、第7天、第14天和第21天，将TNBS溶液灌注至B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠的结肠腔内。对照组（Sham）接受PBS的直肠注射。治疗组分别接受抗TL1A抗体RVT-3101（8 mpk，由外部提供）、抗人TL1A抗体TEV-48574（20 mpk，由外部提供）以及抗人IL23p19抗体Risankizumab（8 mpk，由外部提供）的单药或联合治疗。(A) 体重变化。(B) DAI评分。在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠中建立了由TNBS诱导的慢性结肠炎疾病模型，给药抗TL1A抗体RVT-3101和TEV-48574以及抗人IL23p19抗体Risankizumab有效改善了TNBS诱导的慢性结肠炎，而RVT-3101与Risankizumab的联合治疗效果更佳。数据以均值 ± 标准误（SEM）表示。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001，与溶剂对照组相比，采用方差分析（ANOVA）。
注：本实验由外部使用 B-hTL1A/hIL23A/hIL12B 小鼠进行。
图5B：TNBS诱导的慢性结肠炎模型中的H&E及Masson染色病理分析
B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠TNBS诱导的慢性结肠炎模型的H&E染色和Masson染色。在第0天、第7天、第14天和第21天，将TNBS溶液灌注到B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠的结肠腔内。对照组（Sham）接受PBS直肠注射。治疗组接受抗TL1A抗体RVT-3101（8 mpk，由外部提供）、抗人TL1A抗体TEV-48574（20 mpk，由外部提供）以及抗人IL23p19抗体Risankizumab（8 mpk，由外部提供），单独或联合使用。(A)病理评分。(B)Masson染色评分。在 B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠中建立了由 TNBS 诱导的慢性结肠炎疾病模型，给予抗TL1A抗体RVT-3101和TEV-48574以及抗人IL23p19抗体Risankizumab后，有效缓解了结肠病理损伤和纤维化进展。数据以均值 ± 标准误（SEM）表示。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001，与溶剂对照组相比，采用方差分析（ANOVA）。
注：本实验由外部使用 B-hTL1A/hIL23A/hIL12B 小鼠进行。
图5C：COL1A1表达分析
通过免疫组化（IHC）对B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠TNBS诱导的慢性结肠炎模型进行COL1A1表达分析。在第0天、第7天、第14天和第21天，将TNBS溶液灌注至B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠的结肠腔内。对照组（Sham）接受PBS直肠注射。治疗组单独或联合使用抗TL1A抗体RVT-3101（8 mpk，由外部提供）、抗人TL1A抗体TEV-48574（20 mpk，由外部提供）、抗人IL23p19抗体Risankizumab（8mpk，由外部提供）单独或联合给药。在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠中建立了TNBS诱导的慢性结肠炎疾病模型，结果显示，给药抗TL1A抗体RVT-3101和TEV-48574可有效降低平滑肌组织中COL1A1的表达。数值以均值 ± 标准误（SEM）表示。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001，与溶剂对照组相比，采用方差分析（ANOVA）。
注：本实验由外部使用 B-hTL1A/hIL23A/hIL12B 小鼠进行。
除TNBS化学诱导模型外，百奥赛图进一步在 B-hTL1A/hIL23A/hIL12B, Rag2 KO 小鼠（Cat# 114014）中建立了两种免疫驱动型结肠炎药效体系：T细胞转移诱导结肠炎模型和Anti-CD40抗体诱导结肠炎模型。前者依赖转移T细胞介导的慢性肠道炎症，更适合评价TL1A/IL-23轴在T细胞相关炎症中的作用；后者通过CD40激活诱导急性肠道炎症，更适合验证IL-23通路阻断药物的体内疗效。
图6A：体重变化与DAI评分、结肠长度与重量
RVT3101和Risankizumab对B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2基因敲除小鼠中T细胞转移诱导性结肠炎模型的治疗效果。从 B-hIL23A/hIL12B/hIL23R/hIL12RB1 plus 小鼠的脾脏中分离出 CD4+CD45RBlow T 细胞和 CD4+CD45RBhigh T 细胞。G1组的B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2敲除小鼠被注射了CD4+CD45RBlow T细胞，而G2-G5组的B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2敲除小鼠则被注射了CD4+CD45RBhigh T细胞。各治疗组每三天接受抗TL1A抗体RVT3101（8 mpk，由药明康德提供）、抗人IL23p19抗体Risankizumab（8 mpk，由药明康德提供）的单药或联合治疗。（A）体重变化。（B）DAI评分。（C）结肠指数。（D）结肠照片。采用双因素方差分析（ANOVA）或单因素方差分析（ANOVA）进行多重比较，各组均与溶剂对照组进行比较。数据以均值 ± 标准误（SEM）表示。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。注：本实验由药明康德（WuXi AppTec）完成，采用B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2基因敲除小鼠（供体：B-hIL23A/hIL12B/hIL23R/hIL12RB1加小鼠）模型，通过T细胞输注诱导慢性结肠炎。
图6B：体重变化与DAI评分、结肠长度与重量
抗人IL23p19抗体在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2基因敲除小鼠中对抗小鼠CD40抗体诱导的结肠炎模型的治疗效果。G1组的B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2基因敲除小鼠接受PBS处理，G2-G3组的B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2基因敲除小鼠接受抗CD40抗体处理。每日记录体重和DAI评分。第5天处死小鼠，并记录结肠长度和重量。(A) 体重变化。(B) DAI评分。(C) 结肠指数。(D) 结肠照片。多重比较采用双因素方差分析（ANOVA）或单因素方差分析（ANOVA），各组均与G2组进行比较。数据以均值 ± 标准误（SEM）表示。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图6C：体重变化与DAI评分、结肠长度与重量
抗人IL23p40抗体在B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2基因敲除小鼠中对抗小鼠CD40抗体诱导的结肠炎模型的治疗效果。G1组的B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2基因敲除小鼠接受PBS处理，G2-G3组的B-hTL1A/hIL23A/hIL12B、Rag2基因敲除小鼠接受抗CD40抗体处理。每日记录体重和DAI评分。第5天处死小鼠，并记录结肠长度和重量。(A) 体重变化。(B) DAI评分。(C) 结肠指数。(D) 结肠照片。多重比较采用双因素方差分析（ANOVA）或单因素方差分析（ANOVA），各组均与G2组进行比较。数据以均值 ± 标准误（SEM）表示。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
TL1A从被“发现”到被“验证”，用了不到三年。2023年收购热、2024年NEJM II期数据、2026年III期注册成功——这条线索在临床端已经跑通。剩下来的问题是：单靶够不够？多靶联合是不是更好？不同的肠炎病因（化学、先天免疫、T细胞转移）下，同一个药的表现会不会分化？
百奥动物B-hTL1A/hIL23A/hIL12B小鼠试图回答的正是这些问题。一个模型同时携带三个靶点的验证窗口——TL1A、IL-23p19和IL-12/23p40——意味着在同批动物上就能横向比较anti-TL1A、anti-IL-23和anti-IL-12/23的差异，也能直接跑联用方案。这在单靶点人源化小鼠上做不了，在多批动物间交叉比对又不够干净。
如果你关注的是anti-TL1A、anti-IL-23p19或IL-12/IL-23p40通路——无论单靶还是多靶——以下模型可以帮你跑第一个实验。
参考文献:
[1] Merck. Merck's Tulisokibart Met Primary and Key Secondary Endpoints in the Phase 3 ATLAS-UC Induction-only Study. Business Wire. 2026-06-22.
[2] Jacob N, et al. Direct signaling of TL1A-DR3 on fibroblasts induces intestinal fibrosis in vivo. Scientific Reports. 2020;10:18189.
[3] Siegel M, et al. Discovery, development, and characterization of SPY002 and SPY072, two novel extended half-life monoclonal antibodies targeting TL1A. mAbs. 2026;18(1):2670848.
[4] Richard AC, et al. The TNF-family cytokine TL1A: from lymphocyte costimulator to disease co-conspirator. Journal of Leukocyte Biology. 2015;98(3):333-345.
[5] Duerr RH, et al. A genome-wide association study identifies IL23R as an inflammatory bowel disease gene. Science. 2006;314(5804):1461-1463.
